برای اینکه این تحقیق اثبات شود، شرکت کنندگان نباید گیاه خوار می بودند. همچنین قبل از تحقیق از نوشیدن چای، مصرف آنتی اکسیدان یا پروبیوتیک منع شدند. و در طول دوره انجام آزامایش نباید هر روز بیشتر از 7 واحد میوه و سبزی مصرف می کردند.
پروفسور Sue Percival توضیح می دهد : محدودیت های از جمله فیبر، چای و پروبیوتیک به سیستم ایمنی بدن کمک می کند، به همین دلیل محققان نمیخواستند با افرادی آزمایش را انجام دهند که سیستم ایمنی قوی داشتند.